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水螅整体装片的制作

2019-06-29 16:04:13 养殖种植技术书籍

水螅整体装片的制作

目的 了解显微镜玻片制作的意义,学会几种整体装片的操作过程和方法。

实验前的思考 整体装片制作法,可以用于封固小形动、植物的整个身体,或个别组织和器官,所需的仪器、药品及方法都比较简单,制成永久装片后能长期保存。

材料器具 水螅;玻璃缸,表面皿,吸管;70%无水乙醇,氨水,1%盐酸,二甲苯,波因(Bouin)氏固定液,硼砂洋红染液。

步骤

1.波因氏固定液的配制 75毫升苦味酸饱和水溶液中加入25毫升甲醛,在临用时再加入5毫升冰乙酸。

2.固定 固定水螅时,先在表面皿里面放少量水,然后用吸管把水螅从培养缸中吸出,放在表面皿内。等水螅身体和触手慢慢伸展后,用加热的波因氏液(30~34℃)固定。固定液要多一些,倾倒时要迅速,也可用吸管吸取加热的波因氏液浇射在水螅上,浇射的方向必须从基部到触手端,浇射的时间必须极短,不要把固定液滴入水内,这样水螅才不至于收缩。在波因氏固定液中固定4~8小时。

3.浸入70%乙醇中,每天更换一次70%乙醇,直到洗去标本上因固定液而染上苦味酸的黄色为止。如果需要快一些去色,可以加1~2滴氨水。

如果使用氨水去色,则在黄色除去后,仍应该换两次70%乙醇,以除去氨水的碱性。

4.染色 浸入硼砂洋红染液(配制方法参见本书第836页)中,染24小时。

5.褪色 用1%盐酸乙醇褪色,时间为0.5~1分钟,褪到内部器官能看清楚为止。

6.脱水 依次浸入70%乙醇、80%乙醇、95%乙醇及无水乙醇。

7.透明 用二甲苯透明。中途更换一次新液,至透明为止。

8.封片 用树胶封片,树胶可以浓一些。

注意事项

1.制作水螅整体装片最重要的步骤是固定,如果这一步骤处理不好,水螅的触手和身体都会收缩,制成的标本就不能使用,所以采取有效的方法来固定是成功的关键。

2.在制作水螅装片时要非常小心,稍不注意就会弄碎或折断触手,特别在二甲苯中更容易弄碎或折断,所以在整个制作过程中,尽可能少用镊子夹镊,也不宜多次更换盛器,最好只换溶液(如乙醇、二甲苯)不换盛器。

3.褪色时,标本不能在盐酸乙醇中停留过久,否则颜色会全部褪尽。

(唐文钧)

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