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雄蟾蜍抱对行为跟性激素关系的验证

2019-06-29 16:02:47 养殖种植技术书籍

雄蟾蜍抱对行为跟性激素关系的验证

目的 了解促性腺激素对雄蟾蜍抱对行为的影响,并学会配制和提取促性腺激素的技能。

实验前的思考 雄蟾蜍抱对行为的发生除了跟生殖细胞的成熟有关,还和体内分泌的性激素的多少有关。只有当雄蟾蜍体内既有了成熟的精子,又有了一定数量的促性腺激素的条件下,才发生抱对行为。性激素的分泌又跟季节的变化有密切的关系。因此,对于成熟的雄蟾蜍,可以用人为的办法增加蟾蜍体内的促性腺激素,从而促使它发生抱对行为。促性腺激素可以用现成药剂配制或从蟾蜍身上提取两种方法获得。

材料器具 雌、雄蟾蜍;显微镜,载玻片,盖玻片,滴管,小试管,玻璃棒,解剖器材,注射器;人绒毛膜促性腺激素针剂(药房有售),任氏液。

步骤

1.促性腺激素的配制或制取

(1)配制人绒毛膜促性腺激素 把一支人绒毛膜促性腺激素溶于10毫升任氏液中,吸取5毫升(内含250单位)用于注射。

(2)制取脑垂体混悬液 用5只大的蟾蜍(雌雄不论),沿着两端口裂处剪下它们的头(见上页图)。再用剪刀从口腔后面塞入头后部小孔内,斜向左右眼的方向各剪一刀,揭开这块骨片,就能看到约有半粒芝麻大小的粉红色小球,即脑垂体(见上页图)。用镊子轻轻摘取脑垂体,放入盛有5毫升任氏液的小试管中,用玻璃棒把脑垂体研碎,磨细,混匀后备用。

2.选用2只体重在30克以上,还没有抱对行为的雄蟾蜍(可在饲养时观察确定),用滴管分别从泄殖腔内吸取少量液体,滴在载玻片上,镜检有没有精子存在。如果有,就另选一只。

3.把配制的人绒毛膜促性腺激素或脑垂体混悬液用注射器注射到雄蟾蜍的腹腔中;另取一只在腹腔内注射5毫升的任氏液,作为对照用。

4.2只注射过的雄蟾蜍分别跟成熟的雌蟾蜍放入同一装有少量水的玻璃缸中,并做好标记。

5.过4~6小时,观察哪只雄蟾蜍发生了抱对行为。

6.分别从两只雄蟾蜍的泄殖腔内吸取少量液体,镜检哪只有大量精子存在。

注意事项

1.鉴别雄蟾蜍的方法,通常是用拇指和食指用力压它的腹部,能鸣叫的是雄的。雄性下颌两侧有鼓起的鸣囊。

2.注射时,注意针头进入腹部后沿着腹肌方向平行推进,以免刺伤内脏或注射到肠腔里。

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