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酶专一性和高效性的验证

2019-06-29 16:02:07 养殖种植技术书籍

酶专一性和高效性的验证

目的 通过对不同酶消化作用的比较来验证酶作用的专一性;通过增加酶的稀释度来说明酶作用的高效性。

实验前的思考 酶是由生物细胞所产生的一类蛋白质,在生物体内新陈代谢的许多化学反应中起催化剂作用。作为生物催化剂的酶,跟一般的化学催化剂不同,它表现出高度的专一性和高效性,这是酶作用的两个显着特征。

材料器具 蛋白花,菠萝汁,稀释唾液;试管,移液管,烧杯,酒精灯,三角架,石棉网,温度计,火柴;1%淀粉糊,胃蛋白酶液,革兰氏碘液。

方法一 唾液淀粉酶的特性

步骤

1.验证酶作用的专一性 准备2支试管,分别编号后,在2支试管内各装入1%淀粉糊2毫升。在1号试管内加入稀释唾液2毫升,2号试管内加入胃蛋白酶液2毫升,把这2支试管放在37℃水浴中保温处理10分钟。

2.验证酶作用的高效性 准备4支试管,分别编号后,在4支试管内各装入9毫升蒸馏水。在1号试管内加入1毫升未经稀释的唾液,充分摇匀。用一移液管吸取1号试管中的唾液稀释液1毫升到2号试管中,充分摇匀。另取一移液管,吸取2号试管内的唾液稀释液1毫升到3号试管中,充分摇匀。用同样的方法,从3号试管中吸取唾液稀释液1毫升到4号试管。于是,1号、2号、3号、4号试管内的唾液,分别稀释了10倍、100倍、1000倍和10000倍(见图)。随后,在上述试管内各加入1%淀粉糊1毫升,把4支试管放在37℃水浴中保温处理30分钟。在这期间,每隔5分钟从各试管中取出少量水样,用革兰氏碘液测试并观察水样的颜色变化。

注意事项 在使唾液逐渐稀释过程中,应该注意把试管中的唾液充分摇匀,所用的移液管应该清洁,以尽可能使唾液稀释度精确。

分析和讨论

1.1号试管水样用革兰氏碘液测试,不呈现蓝色反应,说明管内淀粉已被唾液中唾液淀粉酶所分解,而没有淀粉的存在;而2号试管中的水样用革兰氏碘液测试则呈现蓝色反应,说明有淀粉存在。这结果表明,对淀粉产生消化作用的酶是唾液淀粉酶,而不是胃蛋白酶,由此证明了酶作用的专一性。

2.通过间隔一定时间从4支试管中取出少量水样测试结果表明,4支试管由于唾液稀释度不等,各管中淀粉被充分水解所需时间也不同。由于唾液淀粉酶在唾液中本身已被稀释,所以4号试管内的唾液淀粉酶实际上稀释了远不止10000倍,这样高的稀释度仍能把淀粉充分水解,证明了酶作用的高效性。

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